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本項(xiàng)目根據(jù)球形孢子絲菌的細(xì)胞壁特點(diǎn)，聯(lián)合機(jī)械法、化學(xué)法、酶解法，設(shè)計(jì)并開(kāi)發(fā)了適用于球形孢子絲菌胞壁蛋白的粗提方法，該方法可以獲得多種胞壁蛋白，回收率高，并可對(duì)特異性抗原成分進(jìn)行進(jìn)一步純化（該部分內(nèi)容已經(jīng)申請(qǐng)一項(xiàng)國(guó)家發(fā)明專利）。對(duì)粗提的孢子絲菌病患者血清進(jìn)行了免疫印跡篩選并結(jié)合LC/MS方法對(duì)蛋白條帶的序列進(jìn)行檢測(cè)，鑒定出球形孢子絲菌HSP70_1-8和HSP70_5蛋白。利用大腸桿菌原核表達(dá)體系構(gòu)建了HSP70_1-8和HSP70_5表達(dá)體系，獲得了相應(yīng)質(zhì)粒表達(dá)的重組蛋白并通過(guò)重組蛋白免疫新西蘭兔后，獲得了高純度的多克隆抗體（該部分內(nèi)容已經(jīng)申請(qǐng)三項(xiàng)國(guó)家發(fā)明專利）。利用膠體金免疫層析方法，制備出了靶點(diǎn)為三種重組蛋白的孢子絲菌病檢測(cè)試劑條。